您现在的位置是: 首页 > 热门汽车 热门汽车

abts工作液的配制_ABTS工作液的配制

ysladmin 2024-06-26 人已围观

简介abts工作液的配制_ABTS工作液的配制       在这个数字化的时代,abts工作液的配制的更新速度越来越快。今天,我将和大家分享关于abts工作液的配制的今日更新,让我们一起跟上时代的步伐。1.酶

abts工作液的配制_ABTS工作液的配制

       在这个数字化的时代,abts工作液的配制的更新速度越来越快。今天,我将和大家分享关于abts工作液的配制的今日更新,让我们一起跟上时代的步伐。

1.酶联免疫法的注意事项

abts工作液的配制_ABTS工作液的配制

酶联免疫法的注意事项

       ⒈ 正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。

       ⒉ 在ELISA中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:

       ⑴ 固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。当前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。

       ⑵ 包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。

       ⑶ 酶标记抗体工作浓度的选择:首先用直接ELISA法进行初步效价的滴定(见酶标记抗体部份)。然后再固定其它条件或采取“方阵法”(包被物、待检样品的参考品及酶标记抗体分别为不同的稀释度)在正式实验系统里准确地滴定其工作浓度。

       ⑷ 酶的底物及供氢体的选择:对供氢体的选择要求是价廉、安全、有明显地显色反应,而本身无色。有些供氢体(如OPD等)有潜在的致癌作用,应注意防护。有条件者应使用不致癌、灵敏度高的供氢体,如TMB和ABTS是当前较为满意的供氢体。底物作用一段时间后,应加入强酸或强碱以终止反应。通常底物作用时间,以10-30分钟为宜。底物使用液必须新鲜配制,尤其是H2O2在临用前加入。

       ABTS

       中文名:2 ,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐

       别名:2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)

       分子式:C18H24N6O6S4 分子量:548.68

       ABTS的配制

       试剂一:0.0384gABTS定容到10mL

       试剂二:0.0134g过硫酸钾定容到10mL

       试剂一与试剂二1:1混合

       12h避光后 得 ABTS工作液

       使用之前以pH7.4的PBS稀释20倍

       好了,今天我们就此结束对“abts工作液的配制”的讲解。希望您已经对这个主题有了更深入的认识和理解。如果您有任何问题或需要进一步的信息,请随时告诉我,我将竭诚为您服务。